Att överföra kolonier från en petriskål till en annan är en grundläggande teknik inom mikrobiologi och cellkultur. Som en petriskålleverantör har jag bevittnat första hand vikten av denna process i olika forskning och experimentella miljöer. I den här bloggen kommer jag att gå igenom steg-för-steg-förfarandet för att överföra kolonier, diskutera nödvändiga material och lyfta fram några tips och försiktighetsåtgärder för att säkerställa en framgångsrik överföring.
Förstå syftet med koloniöverföring
Innan vi går in i överföringsprocessen är det viktigt att förstå varför vi överför kolonier från en petriskål till en annan. Det finns flera orsaker till detta:
- Isolering och rening: Överföring av kolonier gör det möjligt för oss att isolera en enda typ av mikroorganism eller cellinje från en blandad kultur. Detta är avgörande för att få en ren kultur, vilket är nödvändigt för ytterligare analys och experiment.
- Subkultur: Med tiden kan näringsämnena i en petriskål tappas och tillväxtförhållandena kan förändras. Att överföra kolonier till en färsk petriskål ger dem en ny utbud av näringsämnen och en mer gynnsam miljö för tillväxt.
- Långvarig lagring: Kolonier kan överföras till ett lämpligt medium och lagras under specifika förhållanden för långvarig bevarande. Detta är användbart för att upprätthålla en aktiekultur för framtida användning.
Material krävs
För att överföra kolonier från en petriskål till en annan behöver du följande material:
- Petriskålar: Du behöver två petriskålar - en som innehåller de ursprungliga kolonierna (källskålen) och en annan med ett lämpligt tillväxtmedium (destinationsrätt). VårLaboratorieglas 90mm 100 mm 120mm glaspetriskål med lockochLab Glass Petri -skålen 60mm 90mm 100 mm cellodlingsrätt med lockär utmärkta val för detta ändamål. De är tillverkade av högkvalitativt glas, som ger en tydlig bild av kolonierna och är resistenta mot kemisk och termisk stress.
- Ympande slinga eller nål: En ympande slinga eller nål används för att plocka upp kolonierna från källskålen och överföra dem till destinationsrätten. Dessa verktyg är vanligtvis tillverkade av metall och kan steriliseras genom flammande före och efter användning.
- Bunsen -brännare eller sterilisator: En Bunsen -brännare eller sterilisator används för att sterilisera inokulerande slingan eller nålen. Detta hjälper till att förhindra föroreningar av kolonierna under överföringsprocessen.
- Inkubator: En inkubator används för att tillhandahålla en kontrollerad miljö för kolonierna. Temperaturen, fuktigheten och gaskompositionen för inkubatorn kan justeras för att uppfylla de specifika kraven i mikroorganismerna eller cellinjerna som odlas.
- Steril arbetsbänk eller huva: En steril arbetsbänk eller huva används för att minimera risken för kontaminering under överföringsprocessen. Dessa arbetsytor är utrustade med ett HEPA -filter som tar bort luftburna partiklar och mikroorganismer, vilket skapar en ren och steril miljö.
Steg för steg
Nu när du har alla nödvändiga material, låt oss gå igenom steg-för-steg-förfarandet för att överföra kolonier från en petriskål till en annan:
- Förbered arbetsytan: Innan du startar överföringsprocessen, se till att din arbetsyta är ren och steril. Torka ner arbetsbänken eller huven med en desinfektionslösning och slå på Bunsen -brännaren eller sterilisatorn för att värma inokulerande slingan eller nålen.
- Märk destinationsstålen: Använd en markör för att märka destinationsrätten med namnet på mikroorganismen eller cellinjen, datumet och annan relevant information. Detta hjälper dig att hålla reda på dina kulturer och se till att du inte blandar dem.
- Låga inokulerande slingan eller nålen: Håll inokulerande slingan eller nålen vid handtaget och passera den genom Bunsen-brännarens låga eller sterilisator tills den lyser röd het. Detta kommer att sterilisera slingan eller nålen och döda eventuella mikroorganismer eller föroreningar på ytan.
- Låt slingan eller nålen svalna: Efter att ha flammat inokulerande slinga eller nål, låt den svalna i några sekunder innan du använder den för att plocka upp kolonierna. Detta kommer att förhindra att den heta slingan eller nålen dödar kolonierna när du rör vid dem.
- Plocka upp kolonierna: Öppna källskålen och använd inokuleringsslingan eller nålen för att plocka upp en enda koloni från ytan på agar. Var försiktig så att du inte berör andra kolonier eller själva agar, eftersom det kan införa kontaminering.
- Överför kolonierna till destinationsrätten: Öppna destinationsskålen och strimma försiktigt inokulerande slingan eller nålen som innehåller kolonin över agarens yta i ett sicksackmönster. Detta kommer att fördela kolonierna jämnt över agaren och låta dem växa till enskilda kolonier.
- Låga inokulerande slingan eller nålen igen: Efter att ha överfört kolonierna, låga inokulerande slingan eller nålen igen för att sterilisera den och förhindra förorening av nästa kultur.
- Stäng petriskålarna: Stäng käll- och destinationsrätterna tätt för att förhindra förorening och placera dem i inkubatorn vid lämplig temperatur och fuktighet.
- Övervaka koloniernas tillväxt: Kontrollera petriskålarna regelbundet för att övervaka kolonierna. Efter några dagar bör du se enskilda kolonier växa på ytan av agar. Vid behov kan du överföra kolonierna till en ny petriskål för att fortsätta kulturen.
Tips och försiktighetsåtgärder
Att överföra kolonier från en petriskål till en annan kräver noggrann uppmärksamhet på detaljer och strikt anslutning till aseptiska tekniker. Här är några tips och försiktighetsåtgärder som hjälper dig att säkerställa en framgångsrik överföring:
- Arbeta i en steril miljö: Arbeta alltid i en steril arbetsbänk eller huva för att minimera risken för förorening. Använd handskar och en labbrock och undvik att röra vid petriskålarna eller den ympande slingan eller nålen med bara händer.
- Sterilisera utrustningen: Före och efter varje användning steriliserar inokuleringsslingan eller nålen genom att flamma den tills den lyser röd het. Detta kommer att döda alla mikroorganismer eller föroreningar på dess yta och förhindra förorening av kulturerna.
- Använd en enda koloni: När du plockar upp kolonierna, använd alltid en enda koloni från agarens yta. Detta kommer att säkerställa att du överför en ren kultur och förhindrar kontaminering från andra mikroorganismer eller cellinjer.
- Streak agar ordentligt: När du stämmer agaren, använd en mild sicksackrörelse för att fördela kolonierna jämnt över ytan. Undvik att trycka för hårt på agaren, eftersom det kan skada kolonierna och förhindra att de växer.
- Övervaka koloniernas tillväxt: Kontrollera petriskålarna regelbundet för att övervaka kolonierna. Om du märker några tecken på förorening, såsom mögel eller bakterier som växer på agar, kastar kulturen omedelbart och börjar om igen.
Slutsats
Att överföra kolonier från en petriskål till en annan är en enkel men viktig teknik inom mikrobiologi och cellkultur. Genom att följa steg-för-steg-förfarandet som beskrivs i den här bloggen och vidta nödvändiga försiktighetsåtgärder kan du säkerställa en framgångsrik överföring och få en ren kultur av mikroorganismen eller cellinjen du arbetar med.
Som en petriskålleverantör förstår vi vikten av att tillhandahålla högkvalitativa produkter som tillgodoser våra kunders behov. VårLaboratorieglas 90mm 100 mm 120mm glaspetriskål med lockochLab Glass Petri -skålen 60mm 90mm 100 mm cellodlingsrätt med lockär utformade för att ge en tydlig bild av kolonierna och är resistenta mot kemisk och termisk stress. Om du har några frågor eller behöver ytterligare information om våra produkter, tveka inte att kontakta oss. Vi hjälper dig gärna med dina upphandlingsbehov.
Referenser
- Atlas, RM (2010). Handbok för mikrobiologiska medier. CRC Press.
- Cappuccino, JG, & Sherman, N. (2014). Mikrobiologi: En laboratoriehandbok. Pearson.
- Madigan, MT, Martinko, JM, Bender, KS, Buckley, DH, & Stahl, DA (2015). Brock Biology of Microorganisms. Pearson.